荧光定量pcr仪主要应用于临床医学检测、食品行业、科研院校等。今天君意生物的小编就和大家一起来了解一下荧光定量pcr仪:
在普通pcr仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量pcr功能的仪器。其pcr扩增原理和普通pcr扩增原理相同,在pcr扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。
荧光定量pcr仪有单通道,双通道和多通道之分。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重pcr,实现一次检测多种目的基因的功能。
实验室中使用的仪器一般都是很精密的,所以在使用的时候,也要对其进行保养维护,今天君意生物的小编就和大家一起来了解一下如何保养pcr仪:
1. 使用前预热
老款的pcr仪的性能比不上新款仪器,使用前需要进行预热,不仅对仪器维护有好处,还能节约实验时间。新款的仪器升温快,但还是建议能在进行实验前预热2min,这样可以有效延长仪器的使用寿命。
2. 定期运行维护
pcr仪器使用频率较低的情况下,需要在仪器关闭1小时后用软布或塑料纸覆盖以防止灰尘进入。仪器如果长期不使用,需要至少每隔半个月进行一次开机自检,运行20min左右。
pcr仪即基因扩增仪,主要是利用dna聚合酶对特定基因做体外或试管内in vitro的大量合成,用dna聚合酶进行专一性的连锁复制。根据dna扩增的目的和检测的标准可以将pcr仪分为普通pcr仪,梯度pcr仪,原位pcr,实时荧光定量pcr仪四大类。下面就来为大家一一介绍:
1.普通pcr仪
普通pcr仪是一次pcr扩增只能运行一个特定退火温度,如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行,主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。
2.梯度pcr仪
梯度pcr仪是一次性pcr扩增可以设置一系列不同的退火温度条件。主要用于研究未知dna退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的pcr用。
3.原位pcr仪
原位pcr仪是用于从细胞内靶dna的定位分析的细胞内基因扩增仪。可保持细胞或组织的完整性,使pcr反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶dna所在的位置进行基因扩增。对于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有着重大的实用价值。
4.实时荧光定量pcr仪
荧光定量pcr是在普通pcr仪基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。主要应用于临床医学检测、食品行业、科研院校等。
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