pcr就是利用dna聚合酶对特定基因做体外或试管内in vitro的大量合成,基本上它是利用dna聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据dna扩增的目的和检测的标准,可以将pcr仪分为普通pcr仪,梯度pcr仪,原位pcr仪,实时荧光定量pcr仪四类。
pcr的要素基本的pcr须具备1.要被复制的dna模板 template2.界定复制范围两端的引物primers.3.dna聚合酶taq. polymearse4.合成的原料(四种脱氧核苷酸)及水。
pcr仪是一种高精度的仪器,一旦出现一些温度或者检测上的小偏差,很可能对实验结果产生较大的影响,所以我们在日常使用pcr仪的时候,要注意对其的保养,下面就跟随君意生物一起来看看吧:
1、仪器安置
仪器应安放在湿度较低、灰尘较少并远离水源和热源的地方,无腐蚀性气体或强磁场干扰。
环境温度建议在18~35℃之间。仪器之间应保持50cm 以上距离,降低仪器之间的影响。
2. 使用前预热
老款的pcr仪的性能比不上新款仪器,使用前需要进行预热,不仅对仪器维护有好处,还能节约实验时间。新款的仪器升温快,但还是建议能在进行实验前预热2min,这样可以有效延长仪器的使用寿命。
荧光定量pcr仪主要应用于临床医学检测、食品行业、科研院校等。今天君意生物的小编就和大家一起来了解一下荧光定量pcr仪:
在普通pcr仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量pcr功能的仪器。其pcr扩增原理和普通pcr扩增原理相同,在pcr扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。
荧光定量pcr仪有单通道,双通道和多通道之分。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重pcr,实现一次检测多种目的基因的功能。
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