梯度pcr仪是pcr仪的一种，如今梯度pcr仪更多的应用于科研、教学机构。君意生物的小编就和大家一起来了解一下梯度pcr仪：
一次性pcr扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（通常12种温度梯度）的称之为梯度pcr仪。因为被扩增的不同的dnapian段其最适合的退火温度不同，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性pcr扩增就可以筛选出表达量高的最适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知dna退火温度的扩增，这样既节约时间，也节约经费。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的pcr用。正真的梯度，是每一排管都有精准的加热控温探头，2009年为止只有美国abi公司可以做到。其他的都是从两头的热传递来设计控温。
实时荧光定量pcr是一种在dna扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（pcr）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定dna序列进行定量分析的方法。
real-time pcr是在pcr扩增过程中，通过荧光信号，对pcr进程进行实时检测。通过对 pcr 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 pcr 反应中，引入了一种荧光化学物质，随着 pcr 反应的进行，pcr 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线。由于在pcr扩增的指数时期，模板的ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。
实验室使用的pcr仪都是高精度仪器，一旦仪器出现一些温度或者检测上的小偏差，很可能对实验结果产生较大的影响，所以我们在日常使用pcr仪的时候，要注意对其的保养：
1. 仪器安置
仪器应安放在湿度较低、灰尘较少并远离水源和热源的地方，无腐蚀性气体或强磁场干扰。环境温度建议在18-35℃之间。仪器之间应保持50cm以上距离，降低仪器之间的影响。
2．样品台、热盖定期清洁
用95%乙醇配合棉签、无尘布等工具，清洁样品台。之后运行pcr仪，设定保持温度为50℃，约5-10min，让残余液体挥发去除。
另外，热盖也应该用酒精或纯水定期清洗，确保热盖清洁，温控性能良好。对于荧光定量pcr，清洁样品台和热盖的同时，去除灰尘等杂物，保证光路清洁，降低信号干扰。

---

济南君意生物科技有限公司

18660127229
中国 济南