如今市面上的pcr仪器有很多品牌,很多的种类,我们在选购pcr仪器的时候,需要如何来进行选购呢?下面就跟随君意生物的小编一起来了解一下吧:
如今的pcr仪器主要分为三大类:标准pcr(终点pcr)、实时定量pcr(qpcr)以及数字pcr(dpcr)。前两者大家都很熟悉,而后者是这两年冉冉升起的新星。
标准pcr仪主要是产生大量的核酸序列供后续实验使用,比如测序、克隆,或仅仅是为了在凝胶上看看有没有合适的条带。
qpcr则是实时定量靶序列,通常被用来测定生物分子的丰度,而不是生成终产物。“有了qpcr,研究人员就不再关心pcr产物发生了什么。他们的问题是:开始时有什么?突变是否存在?”罗氏的技术服务科学家joe donnenhoffer谈道。
数字pcr也是定量的,但并非实时。反应发生在大量的微小分区中。这些分区很小,其中每个可能包含0或1个dna分子。通过计算阳性反应的数量,研究人员能够真正定量dna。这比qpcr更为灵敏,也不需要标准曲线。
对于标准pcr仪和定量pcr仪之间的选择,研究人员通常都心里有数。不过,说到qpcr和dpcr之间的选择,研究人员就没那么有把握了,有时也需要帮助。据bio-rad的高级营销经理viresh patel介绍,这个选择通常取决于研究人员的应用和他们想要回答的问题。“当我们听到拷贝数分析或突变检测时,数字pcr通常能提供一个更好的答案,更明确的答案,”patel说。不过对于高通量应用,qpcr则更实际。
pcr仪是很精密的一款仪器,在使用时,如果稍有差错就会影响测量的结果,那么如何来对其进行更好的保养维护呢?下面就跟听君意生物为大家讲解一下吧:
1、样品台、热盖定期清洁
用95%乙醇配合棉签、无尘布等工具,清洁样品台。之后运行pcr仪,设定保持温度为50℃,约5~10min,让残余液体挥发去除。
另外,热盖也应该用酒精或纯水定期清洗,确保热盖清洁,温控性能良好。对于荧光定量pcr,清洁样品台和热盖的同时,去除灰尘等杂物,保证光路清洁,降低信号干扰。
2、 定期运行维护
pcr仪器使用频率较低的情况下,需要在仪器关闭1小时后用软布或塑料纸覆盖以防止灰尘进入。仪器如果长期不使用,需要至少每隔半个月进行一次开机自检,运行20min左右。
pcr这项技术,被广泛地运用在医学和生物学的实验室,pcr仪如今应用的也是很广泛,而pcr仪有着而不同的种类,今天君意生物就给大家介绍一下梯度pcr仪:
梯度pcr仪是由普通pcr仪衍生出的带梯度pcr功能的基因扩增仪。pcr反应能否成功,退火温度是关键,梯度pcr仪每个孔的温度可以在规定范围内按照梯度设置。
济南君意生物科技有限公司
18660127229
中国 济南